林可霉素为Streptomycinlincolnensis所发酵生产中广效型抗生素，饲料素检可以单独使用或是中林与spetniomycin合并使用，以促进动物生长及改善饲料效率，可霉对于革兰氏阳性菌、验方霉浆菌及幽门杆菌均具有抗菌作用，法研常用于治疗禽类及猪呼吸道感染症或水产动物链球菌感染，饲料素检与红霉素有拮抗作用，中林不可同时使用。可霉
微生物检测法是验方最早使用于检测林可霉素的方法，但是法研其检测的专一性与准确度皆不理想，以仪器来分析林可霉素可得较准确的饲料素检结果。目前国家标准有关饲料中林可霉素检验是中林以微生物方法为主，在消费者对食品中动物用药品残留愈来愈重视的可霉今天，急需开发仪器定性定量的验方方法以避免争议。故本研究以常见的法研气相层析质谱仪为检测仪器，开发出高准确度与高灵敏度的仪器分析方法。
安捷伦(Agilent)气相层析仪系统，包括气相层析仪(6890N)及质谱仪(5973N)。日立(Hitachi)高效能液相层析系统包括帮浦(L7100)、自动取样器(L7200)、光二极管侦测器(L7450)、试管震荡器(VortexGene2)、12孔吹氮器装置(N-EVAP)、离心机(KN70)、纯水系统(MillporeSynergy185)。
林可霉素(lincomycin)及克林霉素(clindamycin)，分析级药品，购自Sigma-AldrichCo.(St.Louis，MO)；衍生试剂N-methyl-N(trimethylsilyl)trifluoroacetamide(MSTFA)，购自Sigma-AldrichCo.(St.Louis，MO)。甲醇(methanol)LC级药品、冰醋酸(aceticAcid)、醋酸锌(zinicacetatehydrate)及黄铁盐(potassiumhexcyanolerrate(Ⅱ)trihydrate)皆为试药级，购自MerckKGaA.(Darmstadt，Germany)；去离子水(18MΩ)经由MillporeSynergy185纯水系统处理。
15mL及50mLPP材质(polypropylene)含盖离心管，1.5mL及2mL微量试管，10mL及100mL定量瓶，J.T.Baker12孔固相萃取装置，0.22μm孔径PVDF材质(polyvinylidenefluoride)针筒过滤膜，OASIShydrophilic-lipophilicbalance(HLB)材质3mL60mg固相萃取匣。
1)卡瑞试剂Ⅰ，取21.9g醋酸锌加入3mL冰醋酸以去离子水定量至100mL。
2)卡瑞试剂Ⅱ，取10.6g磺铁盐以去离子水定量至100mL。
正确秤取林可霉素及克林霉素标准品10mg分别置于10mL定量瓶中，以甲醇溶解，并定量至10mL，为储存溶液(stocksolution)。此储存液溶含1000μg/mL标准品并存放于2℃～8℃冰箱内，不超过1个月。使用时将林可霉素标准溶液以甲醇稀释至浓度为10μg/mL、5μg/mL、2.5μg/mL、1.25μg/mL及0.625μg/mL，作为检量线溶液。内标准品(internalstandard，IS)克林霉素则以甲醇稀释至浓度为5μg/mL。取100μL各浓度标准品溶液及5μg/mL内标准品溶液置于同一个玻璃样品瓶中，以吹氮气装置浓缩干燥后加入100μLMSTFA，再以铝盖密封后置于烘箱中以80℃加热40min。
将固相萃取匣装置于固相萃取装置中，预先以5mL甲醇及5mL去离子水平衡(condition)后，依序加入5mL10μg/mL的林可霉素溶液(溶于5%的甲醇溶液)、2mL去离子水、2mL5%甲醇溶液及5mL甲醇。分别收集此4部份冲提(eluted)样品以HPLC检测。
正确秤取饲料样品5±0.01g，置于50mL离心管中，加入25mL5%的甲醇，再添加125μL1000g/mL克林霉素，振荡10min后，以4000rpm离心5min，取上清液5mL于15mL的离心管中，加入0.5mL卡瑞试剂Ⅰ及0.5mL卡瑞试剂Ⅱ，振荡混合后以4000rpm离心5min。通过以5mL甲醇及5mL去离子水润溼过的固相萃取管柱，以2mL去离子水冲洗，再以2mL5%甲醇洗净后抽干5min，最后以5mL甲醇冲出。取0.1mL甲醇溶液以氮气吹干，再加0.1mLMSTFA置于80℃烘箱反应30min，即为待测样品。
液相层析仪分析管柱为Luna250×4.6mmI.D.，粒径为5μm，移动相为0.01%磷酸：乙腈=88：12(v/v)，波长设定为210nm，以50μL注入仪器分析。
气相层析仪分析管柱为DB-5MS30m×0.25mmI.D.入口压力13.2psi，He流速1mL/min，温度条件为injector:300℃，升温程序设定150℃恒温1.5min，以20℃/min升温至230℃再恒温3min，以20℃/min升温至300℃再恒温5min。总分析时间为15.92min。以1μL注入分析，分析模式为不分流，以全扫描模式(SCAN)分析。
林可霉素的分子量为406.54g/moL，pKa=7.6，易溶于甲醇。在固相萃取方面，本实验选择了3种品牌的固相萃取匣测试，并在各萃取阶段收集分析，因萃取液含有5%甲醇，实验结果显示，大部分C18固相萃取匣在5%甲醇环境下无法将林可霉素完全吸附。本实验共进行3d的测试，在添加10μg/g、5μg/g及1μg/g的浓度时，相对标准差分别为9.13%、4.00%及13.60%。除了在添加1μg/g时的再现性超过10%，其余皆在10%以内。依测试的结果来看，此分析方法的回收率平均为84%、重复性RSD%平均为7%与再现性RSD%平均为9%，与一般文献中验证的结果差异不大，符合分析方法一般要求，因此可以应用于饲料中林可霉素的检验分析。
林可霉素的分析较少见到以GC/MS的分析方法，经MSTFA衍生化后可以提高其特异性，有助于增加检测感度。依实验结果来看，此方法具有良好的回收率、重复性与再现性，仪器一次分析时间约16min而且不需要复杂的前处理，定性定量方面皆优于HPLC法，亦不须使用LC/MS/MS贵重仪器即能准确的分析，故本方法可应用于饲料中的残留检验。
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